MK-1775

MK-1775是Wee1的有效选择性抑制剂，无细胞试验中IC50为5.2 nM。MK-1775通过磷酸化Tyr15残基消除细胞周期蛋白依赖性激酶1（CDC2）的活性[1]。Wee1是属于Ser/Thr蛋白激酶家族的核激酶。Wee1激酶通过催化CDC2/cyclin B激酶的抑制性酪氨酸磷酸化，负向调节进入有丝分裂。Wee1的功能紊乱导致小于正常的子细胞的生成[2]。

体外实验：MK-1775以剂量依赖性方式抑制CDC2的tyr15磷酸化，并废除G2 DNA损伤检查点。MK-1775以ATP竞争性方式抑制Wee1激酶，在体外激酶测定中的IC50值为5.2 nmol/L。与Wee1相比，MK-1775对于Yes具有2至3倍的效力，IC50值为14 nM，对其它7种激酶的效力低10倍，在1 μM下产生大于>80％抑制，与人类Myt 1相比具有大于100倍的选择性，Myt 1是通过磷酸化Thr14抑制细胞周期蛋白依赖性激酶1（CDC2）的另一个激酶。在携带突变p53的WiDr细胞中，通过阻断Wee1活性来消除DNA损伤检查点，MK-1775抑制CDC2的Tyr15（CDC2Y15）的基础磷酸化，EC50为49 nM，并剂量依赖性地抑制gemcitabine、carboplatin或cisplatin诱导的CDC2磷酸化和细胞周期停滞，其EC50分别为82 nM和81 nM、180 nM和163 nM，以及159 nM和160 nM。在WiDr和H1299细胞中，MK-1775（30-100 nM）没有显著的抗增殖作用，而300 nM的MK-1775足以抑制大于80％的Wee1，抗增殖作用显著，在WiDr细胞中抑制 34.1％细胞，在H1299细胞抑制28.4％[1]。

参考文献：
[1].  Hirai H, Iwasawa Y, Okada M, et al. Small-molecule inhibition of Wee1 kinase by MK-1775 selectively sensitizes p53-deficient tumor cells to DNA-damaging agents[J]. Molecular cancer therapeutics, 2009, 8(11): 2992-3000.
[2].  McGowan C H, Russell P. Cell cycle regulation of human WEE1[J]. The EMBO journal, 1995, 14(10): 2166.