• 欢迎来到美国APExBIO中文站,专注小分子抑制剂、激动剂、拮抗剂及化合物库!

 


加 微 信 得 红 包
ApexBio
Search Site

Phosbind 系列

磷酸化蛋白分析的新方法

Phosbind系列产品用于磷酸化蛋白或多肽的分离、纯化和检测。

蛋白磷酸化是一种重要的共价翻译后修饰,可以改变蛋白的结构,从而调控靶蛋白的功能、位置和特异性结合。因而,用于确定蛋白磷酸化状态(即,磷酸化蛋白质组学)的方法对于评估多种生物学和病理过程非常重要。

Phosbind是一种新型的磷酸盐结合标签和功能分子,在中性pH(生理pH)条件下可以特异性结合磷酸离子。

Phosbind是一种双环金属络合物(1,3-bis[bis(pyridin-2-ylmethyl) amino]propan-2-olato dizinc(II) complex),是一种选择性的磷酸结合标签,在中性pH的水溶液中,其对苯基磷酸酯二价阴离子(PH-OPO32-)的Kd值为25 nM。

Phosbind可用于磷酸化蛋白的特异性分离(Phosbind Acrylamide)以及Western Blot方法对磷酸化蛋白的检测(Phosbind Biotin)。

  1. 产品编号 产品名称 信息
  2. F4002 Phosbind Acrylamide 等同于Phos-tag Acrylamide,用于磷酸化和非磷酸化蛋白的分离
  3. F4001 Phosbind Biotin BTL-104 等同于Phos-tag Biotin BTL-104,用于磷酸化蛋白的检测
  4. F4004 Phosbind Biotin BTL-105 等同于Phos-tag Biotin BTL-105,用于磷酸化蛋白的检测和纯化
  5. F4003 Phosbind Acrylamide Kit 等同于Phos-tag Acrylamide,包含MnCl2,用于磷酸化和非磷酸化蛋白的分离
  6. F4005 Phosbind Biotin BTL-104 Kit 等同于Phos-tag Biotin BTL-104,包含ZnCl2,用于磷酸化蛋白的检测
  7. F4006 Phosbind Biotin BTL-105 Kit 等同于Phos-tag Biotin BTL-105,包含ZnCl2,用于磷酸化蛋白的检测和纯化

6 条记录

per page

Set Descending Direction

Phos-tag引用

Phosbind的基本结构

• <Zn2+-Phosbind>:在pH 5 ~ 8时与磷酸基以1:1的比例形成的稳定复合物。

• <Mn2+-Phosbind>:在pH 9左右时与磷酸基以1:1的比例形成的稳定复合物。

特点

1. 对磷酸根离子(2-)结合的选择性比对其它阴离子高得多。

2. 在生理条件(pH 5 ~ 8)下即可形成稳定的复合物。

3. 可识别Ser / Thr / Tyr 的所有磷酸化形式。

4. 不需要放射性同位素标记。

5. 可适用于免疫印迹和质谱分析等后续操作。

参考文献

1. E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, M. Matsubara, Y. Aoki, S. Ohie, Y. Mouri, and T. Koike. Two-dimensional phosphate affinity gel electrophoresis for the analysis of phosphoprotein isotypes , Electrophoresis, 30, 550-559 (2009).

2. T. Tanaka, G. Horiuchi, M. Matsuoka, K. Hirano, A. Tokumura, T. Koike, and K. Satouchi. Formation of lysophosphatidic acid, a wound-healing lipid, during digestion of cabbage leaves, Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry,73, 1293-300 (2009).

3. K. Takiyama, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, Y. Fujioka, Y. Kubo, and T. Koike. A Phos-tag-based fluorescence resonance energy transfer system for the analysis of the dephosphorylation of phosphopeptides, Analytical Biochemistry, 388, 235-241, (2009)

4. E. Kinoshita-Kikuta, E. Kinoshita, and T. Koike. Phos-tag beads as an immunoblotting enhancer for selective detection of phosphoproteins in cell lysates, Analytical Biochemistry, 389, 83-85, (2009).

5. E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, H. Ujihara, and T. Koike. Mobility shift detection of phosphorylation on large proteins using a Phos-tag SDS-PAGE gel strengthened with agarose, Proteomics, 9, 4098- 4101 (2009).

6. J. Morishige, M. Urikura, H. Takagi, K. Hirano, T. Koike, T. Tanaka, and K. Satouchi. A clean-up technology for the simultaneous determination of lysophosphatidic acid and sphingosine-1-phosphate by matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry using a phosphate-capture molecule, Phos-tag, Rapid Communications in Mass Spectrometry, 24, 1075-1084 (2010).

7. E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, H. Nakashima, and T. Koike. Genotyping and mapping assay of single-nucleotide polymorphisms in CYP3A5 using DNA-binding zinc(II) complexes, Clinical Biochemistry, 43, 302-306 (2010).

8. Y. Sugiyama, N. Hatano, N. Sueyoshi, I. Suetake, S. Tajima, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, T. Koike, and I. Kameshita. The DNA-binding activity of mouse DNA methyltransferase 1 is ragulated phosphorylation with casein kinase 1σ/ε, Biochemical Journal, 427, 489-497 (2010).