KU-0063794
mRNA synthesis
In vitro transcription of capped mRNA with modified nucleotides and Poly(A) tail
Tyramide Signal Amplification (TSA)
TSA (Tyramide Signal Amplification), used for signal amplification of ISH, IHC and IC etc.
Phos Binding Reagent Acrylamide
Separation of phosphorylated and non-phosphorylated proteins without phospho-specific antibody
Cell Counting Kit-8 (CCK-8)
A convenient and sensitive way for cell proliferation assay and cytotoxicity assay
SYBR Safe DNA Gel Stain
Safe and sensitive stain for visualization of DNA or RNA in agarose or acrylamide gels.
Inhibitor Cocktails
Protect the integrity of proteins from multiple proteases and phosphatases for different applications.
Ku-0063794是一种特异性的mTOR抑制剂，对mTORC1和mTORC2抑制的IC50值大约为10 nM[1]。
mTOR（哺乳动物雷帕霉素靶蛋白）蛋白激酶位于信号通路的关键位置，调节细胞生长和增殖。各种癌驱动基因突变，如受体酪氨酸激酶、RAS、PI3K（磷酸肌醇3-激酶）和PTEN，通过活化mTOR激酶诱导增殖、生长和存活。mTOR通过磷酸化和促进AGC家族激酶的激活促进细胞生长，AGC是蛋白激酶A 、蛋白激酶G和蛋白激酶C等的统称，主要有Akt（蛋白激酶B）、S6K（P70核糖体S6激酶）和SGK（血清和糖皮质激素蛋白激酶）。mTORC1磷酸化S6K的疏水残基，而mTORC2磷酸化Akt和SGK的疏水残基。Ku-0063794在体外和体内同时抑制mTORC1和mTORC2，可用于解析mTOR途径的细胞功能[1]。
在HEK-293细胞中，Ku-0063794抑制内源性免疫沉淀的mTORC1和mTORC2的活性，其以S6K1和Akt为底物，IC50值大约为10 nM。Ku-0063794可快速抑制S6K1活性和磷酸化，浓度100-300 nM 的Ku-0063794完全抑制氨基酸诱导的S6K1和S6蛋白的磷酸化。Ku-0063794抑制Akt苏氨酸308位点的磷酸化。Ku-0063794对其他靶蛋白的作用也进行了评估。然而，它不抑制检测的76种其它蛋白激酶以及七个脂质激酶，包括1a类PI3Kα和PI3Kβ[1,2]。
在转导表达BCR/ABL的反转录病毒载体的造血细胞进行骨髓重建的小鼠中，用获得的原代CML细胞进行甲基纤维素集落实验，评估Ku-0063794对PI3K信号通路的抗白血病作用。结果表明，1000 nM 的Ku-0063794完全抑制原代小鼠CML的集落形成。此外，在表达不依赖于其突变状态的BCR/ABL的BA/F3细胞中，Ku-0063794显著减少细胞增殖。Ku-0063794是理想的治疗策略，可以影响BCR/ABL下游的致癌基因信号[2]。
参考文献：
1. Garcia-Martinez J, Moran J, Clarke R, et al. Ku-0063794 is a specific inhibitor of the mammalian target of rapamycin (mTOR)[J]. Biochem. J, 2009, 421: 29-42.
2. Schuster K, Zheng J, Arbini A A, et al. Selective targeting of the mTORC1/2 protein kinase complexes leads to antileukemic effects in vitro and in vivo[J]. Blood cancer journal, 2011, 1(9): e34.
| Physical Appearance | A solid |
| Storage | Store at -20°C |
| M.Wt | 465.54 |
| Cas No. | 938440-64-3 |
| Formula | C25H31N5O4 |
| Solubility | insoluble in H2O; insoluble in EtOH; ≥11.65 mg/mL in DMSO |
| Chemical Name | [5-[2-[(2R,6S)-2,6-dimethylmorpholin-4-yl]-4-morpholin-4-ylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-2-methoxyphenyl]methanol |
| SDF | Download SDF |
| Canonical SMILES | CC1CN(CC(O1)C)C2=NC3=C(C=CC(=N3)C4=CC(=C(C=C4)OC)CO)C(=N2)N5CCOCC5 |
| 运输条件 | 蓝冰运输或根据您的需求运输。 |
| 一般建议 | 不同厂家不同批次产品溶解度各有差异，仅做参考。若实验所需浓度过大至产品溶解极限，请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。溶液形式一般不宜长期储存，请尽快用完。 |
| 激酶实验 [1]: | |
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mTOR 复合物激酶实验 |
使用Hepes裂解液裂解HEK-293细胞。使用结合了免疫前抗体IgG的G蛋白琼脂糖凝胶 (5 ~ 20 μL)，对溶解产物 (1 ~ 4 mg) 进行预处理。再将裂解提取物与结合了抗Rictor抗体、抗Raptor抗体或免疫前抗体IgG (5 ~ 20 μg) 的G蛋白琼脂糖凝胶 (5 ~ 20 μL)一起孵育。所有抗体共价结合到G蛋白琼脂糖凝胶上。在振动转载台上，免疫沉淀于4 °C下进行1小时。使用Hepes裂解液冲洗免疫沉淀物4次，随后使用Hepes激酶缓冲液冲洗2次。对于Raptor免疫沉淀物（用于S6K1磷酸化），在最初的2次冲洗中，缓冲液含0.5 M NaCl，以保持激酶的最佳活性。血清饥饿的 HEK-293细胞中分离的GST-Akt1与PI-103(1 μM 进行 1 小时)温育。将血清饥饿的HEK-293细胞与PI-103（1 μM，1小时）孵育，分离GST-Akt1。将血清饥饿的HEK-293细胞与Rapamycin（1 μM，1小时）孵育，分离GST-S6K1。在KU-0063794和GST-Akt1 (0.5 μg) 或GST-S6K1 (0.5 μg) 存在或不存在的情况下，加入0.1 mM ATP和10 mM MgCl2，开始mTOR反应。在30 °C下，反应在振动转载台上进行30分钟。然后加入SDS样本缓冲液终止反应。使用0.22 μm孔径大小的Spin-X过滤器将反应混合物过滤，样本进行电泳处理，然后进行免疫印迹分析。 |
| 细胞实验 [1]: | |
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细胞系 |
野生型和mLST8缺陷型MEFs |
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制备方法 |
在DMSO中的溶解度有限。若配制更高浓度的溶液，一般步骤如下：请将试管置于37 °C加热10分钟和/或将其置于超声波浴中震荡一段时间。原液于-20 °C可放置数月。 |
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反应条件 |
~ 3 μM；24、48和72小时 |
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实验结果 |
在野生型和mLST8缺陷型MEFs中，KU-0063794抑制细胞生长。 |
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References: [1]. Garcia-Martinez J, Moran J, Clarke R, et al. Ku-0063794 is a specific inhibitor of the mammalian target of rapamycin (mTOR)[J]. Biochem. J, 2009, 421: 29-42. |
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| Description | KU-0063794 is a potent and highly specific dual-mTOR inhibitor of mTORC1 and mTORC2 with IC50 of ~10 nM. | |||||
| Targets | mTORC1 | mTORC2 | ||||
| IC50 | ~10 nM | ~10 nM | ||||
质量控制和MSDS
- 批次:
化学结构
相关生物数据
