JNK-IN-7
mRNA synthesis
In vitro transcription of capped mRNA with modified nucleotides and Poly(A) tail
Tyramide Signal Amplification (TSA)
TSA (Tyramide Signal Amplification), used for signal amplification of ISH, IHC and IC etc.
Phos Binding Reagent Acrylamide
Separation of phosphorylated and non-phosphorylated proteins without phospho-specific antibody
Cell Counting Kit-8 (CCK-8)
A convenient and sensitive way for cell proliferation assay and cytotoxicity assay
SYBR Safe DNA Gel Stain
Safe and sensitive stain for visualization of DNA or RNA in agarose or acrylamide gels.
Inhibitor Cocktails
Protect the integrity of proteins from multiple proteases and phosphatases for different applications.
JNK-IN-7是一种选择性的JNK抑制剂,作用于JNK1、JNK2和JNK3,IC50值分别为1.54 nM、1.99 nM和0.75 nM。JNK-IN-7也抑制c-Jun的磷酸化,c-Jun是JNK激酶的直接底物。
JNK-IN-8是JNK-IN-7的类似物,含有一个额外的甲基标志。与JNK-IN-7相比,JNK-IN-8显著改善选择性,并消除与IRAK1、PIK3C3、PIP4K2C和PIP5K3的结合。JNK-IN-7和JNK-IN-8对JNK2的抑制需要Cys116的存在。在细胞中,JNK-IN-7在相对高浓度(1-10 mM)时可抑制IRAK-1依赖性的pellino的E3连接酶活性,pellino在Toll受体信号通路中起作用。
IRAK1的抑制剂JNK-IN-7抑制IL-1R细胞中IL-1刺激的Pellino 1活化,而非RAW264.7巨噬细胞中Pam3CSK4刺激的Pellino 1活化。JNK-IN-7也抑制Pam3CSK4刺激的RAW巨噬细胞中c-Jun的磷酸化。
参考文献:
1. Zhang T, Inesta-Vaquera F, Niepel M et al. Discovery of potent and selective covalent inhibitors of JNK. Chem Biol. 2012 Jan 27;19(1):140-54.
2. Goh ET, Arthur JS, Cheung PC et al. Identification of the protein kinases that activate the E3 ubiquitin ligase Pellino 1 in the innate immune system. Biochem J. 2012 Jan 1;441(1):339-46.
Physical Appearance | A solid |
Storage | Store at -20°C |
M.Wt | 493.56 |
Cas No. | 1408064-71-0 |
Formula | C28H27N7O2 |
Synonyms | JNK inhibitor |
Solubility | ≥24.7 mg/mL in DMSO; insoluble in H2O; insoluble in EtOH |
Chemical Name | 3-[[(E)-4-(dimethylamino)but-2-enoyl]amino]-N-[4-[(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl)amino]phenyl]benzamid |
SDF | Download SDF |
Canonical SMILES | CN(C)CC=CC(=O)NC1=CC=CC(=C1)C(=O)NC2=CC=C(C=C2)NC3=NC=CC(=N3)C4=CN=CC=C4 |
运输条件 | 蓝冰运输或根据您的需求运输。 |
一般建议 | 不同厂家不同批次产品溶解度各有差异,仅做参考。若实验所需浓度过大至产品溶解极限,请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。溶液形式一般不宜长期储存,请尽快用完。 |
激酶实验 [1]: | |
基于细胞的c-Jun磷酸化测定 |
使用分别稳定表达GFP-c-Jun 1 ~ 79和GFP-ATF2 19 ~ 106的LanthaScreen c-Jun (1 ~ 79) HeLa细胞系进行基于细胞的c-Jun磷酸化激酶实验。通过测定铽标记的磷酸化c-Jun特异性抗体与GFP之间的TR-FRET以检测磷酸化程度。将细胞加入含白色组织培养液的384孔板中,每孔含10,000个细胞和32 μL测定液(Opti-MEM,含0.5%经过活性炭/葡聚糖处理的FBS,100 U/mL Penicillin,100 μg/mL Streptomycin,0.1 mM非必需氨基酸,1 mM丙酮酸钠,25 mM HEPES [pH 7.3]和少量酚红)。孵育过夜后,使用4 μL测定缓冲液将JNK-IN-7稀释到指定浓度,再将其加入到细胞中预处理90分钟,加入4 μL含5 ng/mL of TNF-α的测定缓冲液(最终体积为40 μL)孵育30分钟以激活细胞。吸除培养液,加入20 μL裂解缓冲液(20 mM Tris-HCl [pH 7.6],5 mM EDTA,1% Nonidet P-40 替代物,5 mM NaF,150 mM NaCl和1:100蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物,分别为P8340和P2850)裂解细胞。裂解液包括2 nM铽标记的抗c-Jun (pSer73) 测定抗体。在室温下,实验平衡60分钟,使用BMG Pherastar荧光板读取器测定TR-FRET发射率。测定参数为:在340 nm处激发,在520和490 nm处发射;100毫秒滞后时间;200微秒积分时间;发射率 = Em 520/Em 490。使用GraphPad Prism 4分析所有数据并绘图。 |
细胞实验 [2]: | |
细胞系 |
人IL-1R细胞和RAW264.7巨噬细胞 |
制备方法 |
溶于DMSO。若配制更高浓度的溶液,一般步骤如下:请将试管置于37℃加热10分钟和/或将其置于超声波浴中震荡一段时间。原液于-20℃可放置数月。 |
反应条件 |
0.1、1和10 mM;1小时 |
实验结果 |
在人IL-1R细胞中,JNK-IN-7抑制IL-1β诱导的c-Jun磷酸化和Pellino1活化。在Pam3CSK4诱导的RAW巨噬细胞中,JNK-IN-7也抑制c-Jun磷酸化。 |
References: [1]. Zhang T, Inesta-Vaquera F, Niepel M, et al. Discovery of potent and selective covalent inhibitors of JNK. Chem Biol, 2012, 19(1): 140-154. [2]. Goh ET, Arthur JS, Cheung PC, et al. Identification of the protein kinases that activate the E3 ubiquitin ligase Pellino 1 in the innate immune system. Biochem J, 2012, 441(1): 339-346. |
质量控制和MSDS
- 批次: