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Puromycin dihydrochloride

嘌呤霉素盐酸盐
Catalog No.
B7587
氨酰tRNA类似物,用于表达pac基因的稳定细胞株的筛选
组合的产品项目
规格价格库存 数量
10mM (in 1mL H2O)
¥ 545.00
现货
20mg
¥ 636.00
现货
50mg
¥ 1,272.00
现货

电话: 021-55669583

邮箱: sales@apexbio.cn

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A

背景

Puromycin dihydrochloride(嘌呤霉素盐酸)是氨酰tRNA的类似物,是一种氨基核苷类抗生素,常用于筛选通过质粒转染/转 化、病毒感染等方法能表达pac基因的真核或原核多克隆或单克隆细胞。Puromycin不仅用于稳定细胞株的筛选,也用于稳定细胞株的维持。[1]。它能抑制氨酰tRNA与合成多肽的C末端结合,导致多肽链的提前终止。

嘌呤霉素(Puromycin)对各种真核细胞包括哺乳动物细胞的生长是有毒的。0.510 μg/ml嘌呤霉素可以抑制哺乳动物细胞的生长。嘌呤霉素抑制恶性疟原虫和贾第鞭毛虫生长的IC90值分别是60 μg/ml和54 μg/ml[2]。氨酰tRNA是核糖体上合成的多肽延伸的材料[2]。

不同浓度的嘌呤二盐酸可以改变嗜热四膜虫的生长速率。在第一个24小时,50 μg/ml的嘌呤霉素二盐酸盐将生长速率降低80%,但并没有完全阻断细胞生长,直至72小时,细胞数量才逐渐增加。100 μg/ml嘌呤霉素二盐酸盐完全阻断细胞生长,在第一个48小时,几乎所有的细胞死亡,48小时后存活的细胞快速增长。150 μg/ml的嘌呤二盐酸盐可完全抑制细胞生长长达72小时,在72小时时,大部分细胞死亡,存活的细胞生长。200 μg/ml嘌呤二盐酸盐48小时几乎造成所有的细胞死亡,并没有幸存细胞[2]。

在25日龄的动物中,接触嘌呤霉素盐酸盐180或120分钟可抑制后续的氨基酸转运。然而,嘌呤霉素二盐酸未能抑制50日龄动物中α氨基异丁酸的吸收[3]。

参考文献:
[1]. Mi. Sundaralingami and S. K. Arora. Stereochemistry of nucleic acids and their constituents. IX. The conformation of the antibiotic puromycin dihydrochloride pentahydrate. Proc. N. A. S., 1969, 64(3):1021-6.

[2].Masaaki Iwamoto, ChieMori, Yasushi Hiraoka, et al. Puromycin resistance gene as an effective selection marker for ciliate Tetrahymena. Gene, 2014, 534:249–255.

[3].Elsas L.J. II, MacDonell R.C. Jr. and Rosenberg L.E. Influence of age on insulin stimulation of amino acid uptake in rat diaphragm. J. Biol. Chem., 1971, 246(21):6452-6459.

文献引用

化学属性

Physical AppearanceA solid
StorageStore at -20°C
M.Wt544.43
Cas No.58-58-2
FormulaC22H29N7O5·2HCl
Solubility≥27.2 mg/mL in DMSO; ≥3.27 mg/mL in EtOH with ultrasonic; ≥99.4 mg/mL in H2O
Chemical Name(S)-2-amino-N-((2S,3R,4S,5R)-5-(6-(dimethylamino)-9H-purin-9-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3-yl)-3-(4-methoxyphenyl)propanamide dihydrochloride
SDFDownload SDF
Canonical SMILESO[C@H]1[C@H]([C@@H](CO)O[C@H]1N2C3=NC=NC(N(C)C)=C3N=C2)NC([C@H](CC(C=C4)=CC=C4OC)N)=O.Cl.Cl
运输条件 蓝冰运输或根据您的需求运输。
一般建议不同厂家不同批次产品溶解度各有差异,仅做参考。若实验所需浓度过大至产品溶解极限,请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。溶液形式一般不宜长期储存,请尽快用完。

试验操作

细胞实验 [1]:

细胞系

嗜热四膜虫

制备方法

在DMSO中的溶解度大于10 mM。若配制更高浓度的溶液,一般步骤如下:请将试管置于37 °C加热10分钟和/或将其置于超声波浴中震荡一段时间。原液于-20 °C可放置数月。

反应条件

0 ~ 200 μg/mL;0 ~ 72小时

实验结果

200 μg/mL Puromycin Dihydrochloride于48小时后杀死所有嗜热四膜虫。此后,没有再出现嗜热四膜虫。

动物实验 [2]:

动物模型

25天龄和50天龄的小鼠

给药剂量

0.2 mg/g;腹腔注射

实验结果

Puromycin Dihydrochloride是一种自噬诱导物,能提高游离核糖体的含量。给予Puromycin Dihydrochloride,于30 ~ 60分钟后,高达70%的核糖体恢复其游离形式。

其它注意事项

请于室内测试所有化合物的溶解度。虽然化合物的实际溶解度可能与其理论值略有不同,但仍处于实验系统误差的允许范围内。

References:

[1]. Masaaki Iwamoto, ChieMori, Yasushi Hiraoka, et al. Puromycin resistance gene as an effective selection marker for ciliate Tetrahymena. Gene, 2014, 534:249–255.

[2]. Réz G, Kiss A, Bucsek MJ, Kovács J. Attachment of ribosomes to endoplasmic membranes in mouse pancreas. Degranulation in vivo caused by the inducers of autophagocytosis neutral red, vinblastine, puromycin, and cadmium ions, and prevention by cycloheximide. Chem Biol Interact. 1976 Apr;13(1):77-87.

质量控制